ibidi通道載玻片中貼壁細胞的消化傳代

　　在本應用示例中，我們展示了如何從μ-Slide VI 0.4通道載玻片中洗脫培養后的貼壁細胞。該方法適用于不同規格的通道載玻片。

　　1.根據實驗說明將您的細胞培養到所需的匯合度?！　?/p>

　　裝有細胞和培養基的μ-Slide VI 0.4

　　2.從μ-Slide VI 0.4通道載玻片的通道口中取出培養基，不要吸干整個通道?！　?/p>

　　3.用PBS或任何其他適當的緩沖液清洗兩次，然后從另一端吸出。每個通道使用體積為100μl。我們建議同時使用細胞培養吸引器和移液器。如圖所示，使用吸引器的尖尖位置和移液器（如圖）?！　?/p>

　　µ-Slide VI 0.4的一個通道的橫截面顯示了PBS洗滌步驟

　　4.使用細胞培養吸液器從通道中吸出全部PBS，在這個步驟中，緩沖液從容器口和通道中*去除

　　5.立即用30μl分離溶液（例如胰蛋白酶/EDTA或Accutase）重新填充通道。如圖所示，將移液器吸頭直接放在通道的入口上。將30µl分離溶液填充到空通道中。

　　6.再將您的細胞放入培養箱中。由于生長面積和體積的縱橫比不同，分離過程可能需要比平時更長的時間（2-3分鐘）。用相差顯微鏡觀察細胞脫離。如果沒有發生分離，請增加分離溶液的濃度或使用更長的孵育時間。細胞會在幾分鐘后分離。

　　7.細胞成圓形并分離后，用100μl新鮮培養基或終止溶液沖洗每個通道。分離的細胞被100µl新鮮培養基沖出通道。

　　8.從通道的另一端取出細胞懸液。如果還剩一些細胞，請重復沖洗步驟。

　　9.收集懸浮細胞并去除或稀釋分離溶液　　

　　在細胞懸浮后，可以通過從通道中吸出溶液來收集